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酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）核小體測定

    凋亡細(xì)胞的DNA斷裂使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)核小體。核小體由組蛋白及其伴隨的DNA片斷組成，可由ELISA法檢測。

（一）檢測步驟

1、將凋亡細(xì)胞裂解后高速離心，其上清液中含有核小體；

2、在微定量板上吸附組蛋白體’

3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結(jié)合‘

4、加辣過氧化物酶標(biāo)記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結(jié)合’

5、加酶的底物，測光吸收制。

（二）用途

    該法敏感性高，可檢測5*100/ml個(gè)凋亡細(xì)胞?？捎糜谌?、大鼠、小鼠的凋亡檢測。該法不需要特殊儀器，適合基層工作，但是不能測定凋亡細(xì)胞發(fā)生的絕多對量。

流式細(xì)胞儀定量分析

（一）檢測原理

    細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，其細(xì)胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常細(xì)胞與壞死細(xì)胞之間。利用這一特點(diǎn)，被檢測細(xì)胞懸液用熒光素染色，利用流式細(xì)胞儀測量細(xì)胞懸液中細(xì)胞熒光強(qiáng)度來區(qū)分正常細(xì)胞、壞死細(xì)胞核凋亡細(xì)胞。

（二）應(yīng)用價(jià)值

流式細(xì)胞儀檢測具有以下特點(diǎn)：

1）、檢測的細(xì)胞數(shù)量大，因此其反映群體細(xì)胞的凋亡狀態(tài)比較準(zhǔn)確

2）、可以做許多相關(guān)性分析

3）、結(jié)合被檢測細(xì)胞的DNA含量的分析，可確定凋亡的細(xì)胞所處的細(xì)胞周期